近年来，随生物制药行业上游细胞培养工艺更迭，用于表达目的产品的细胞密度越来越高，从而细胞发酵液中的杂质含量（如细胞碎片、HCP、HCD等）也越来越高。其中最为突出的问题是细胞收获液中的杂质较多，对后续层析工艺提出更高的要求。面对该工艺问题，科百特推出较常规深层滤器有更高的杂质去除能力的深层过滤产品，以下是对该系列产品去除HCP/HCD的介绍及案例。
HCP、HCD概念及要求
宿主细胞残留蛋白HCP（Host cell protein）
是指生物制品生产过程中所使用细胞系产生的蛋白成分，是具有多种生理化学和免疫学特性的复杂混合物，且为工艺相关的主要杂质。
因HCP中有很多成分参与宿主细胞的蛋白质合成，其残留会在生物制品给药过程中存在潜在的免疫原性，引发患者严重的免疫反应。特别是在单克隆抗体药物和基因治疗药物的生产中，HCP残留是宿主细胞在生产过程中产生的非目标蛋白，这些残留蛋白可能会引发机体的免疫应答，影响生物制品的安全性和有效性。
除安全问题外，HCPs的存在也会影响产品质量，如引发治疗性蛋白质的聚集、片段化、制剂成分的降解等，导致蛋白质药物的稳定性受影响。
因此，对HCP残留的检测和控制是生物制品质量控制的关键环节。在2020版中国药典三部各论中表示，HCP标准为占总蛋白含量要小于0.05%。FDA规定，需要用一种灵敏度较高的方法检测药品中的HCP，其含量应该低于检测限（通常小于100ppm）。
宿主细胞残留核酸HCD（Host Cell Residual DNA）
是指经细胞培养表达和纯化的蛋白类药物中，残留的微量核酸(宿主基因组、质粒或总 DNA)，其来源包括宿主细胞的基因组和质粒。由于宿主细胞残留 DNA 可能会传递肿瘤或病毒相关基因，因此有潜在危险性。
《中国药典》三部（2010版）规定，以哺乳细胞基质生产的生物制剂DNA残留量不能超过100 pg／剂，以细菌或真菌为细胞基质生产的疫苗DNA残留量不能超过10 ng／剂。
HCP、HCD去除方法
生物制品生产过程中一般通过下列纯化步骤来降低HCP、HCD水平：深层过滤、亲和层析、离子交换层析、混合层析等。其中深层过滤是通过静电吸附、疏水作用、氢键和分子间相互作用力等原理来去除HCP，HCD和HCP一样，也能够被深层滤器通过吸附作用来去除。
科百特深层过滤新品
科百特深层过滤产品以纤维素纤维作为骨架，硅藻土等助滤剂作为过滤介质，新品则在原有离子型粘合剂的基础上进行优化，使其对于细小杂质的吸附效果更加明显，而对于产品的收率基本没有影响。
其中H6HPPC在原有正电荷吸附机理上继续增强正电荷吸附效果，H4HPPC除了增强原有正电荷吸附效果外，还增加负电荷吸附效果，对于某些带正电HCP有很好的控制效果。
科百特迭代深层滤器优势及案例分享
更高的杂质去除能力
① 案例I
物料信息：
CHO细胞发酵液，活细胞密度18×106 cells/ml，活率83%，滤前浊度＞3300NTU；
过滤信息：
杂质去除数据：
结果：
从上述数据可以看出，在本项目上：
浊度控制能力：H4HPPC＞H6HPPC＞H2HPPC；
HCP去除能力：H4HPPC＞H6HPPC=H2HPPC；
HCD去除能力：H4HPPC＞H6HPPC＞H2HPPC。
② 案例II
物料信息：
CHO细胞发酵液，活细胞密度6.4×106 cells/ml，活率81%，离心处理，滤前浊度158NTU；
过滤信息：
杂质去除数据：
结果：
从上述数据可以看出，在本项目上：
浊度控制能力：H6HPPC＞H4HPPC；
HCP去除能力：H4HPPC＞H6HPPC；
HCD去除能力：H4HPPC＞H6HPPC。
③ 案例III
物料信息：
CHO细胞，Low pH&中和处理，滤前浊度12.2NTU；
过滤信息：
杂质去除数据：
结果：
从上述数据可以看出，在本项目上：
浊度控制能力：H6HPPC＞H4HPPC；
HCP去除能力：H4HPPC＞H6HPPC；
HCD去除能力：H6HPPC＞H4HPPC。
科百特深层过滤迭代产品H4HPPC、H6HPPC在浊度控制、杂质去除上，表现优于常规深层滤器H2HPPC，但是在载量上相对H2HPPC偏低，后续用户若对于浊度控制、杂质去除有较高的要求，可选择H4HPPC、H6HPPC进行测试。
