促红细胞生成素(Erythropoietin，简称EPO)又称红细胞刺激因子、促红素，主要生物学作用是抑制骨髓红细胞凋亡、刺激网状红细胞释放进入血液循环，并刺激细胞内蛋白质合成。它是体内红细胞增殖、分化以及维持外周循环红细胞数量正常的主要造血生长因子。重组人促红细胞生成素(rhEPO)与天然促红细胞生成素(EPO)结构极为相似，二者仅在唾液酸连接上有细微差别。在医学临床上，重组rhEPO主要用于治疗肾功能不全导致的贫血、艾滋病患者贫血、恶性肿瘤相关的贫血等疾病。
rhEPO工艺
目前，我们主要通过基因工程技术将EPO的基因体外重组后导入CHO细胞中，通过培养CHO细胞表达，再经过多步纯化获得重组人促红细胞生成素(rhEPO)。而采用CHO细胞作为rhEPO的生产载体，具有潜在的病毒污染风险。如何稳健的控制潜在病毒污染风险，是rhEPO生产过程的重中之重。根据国内外相关法规指导原则，在同一生产过程中，病毒清除研究的设计和实施需要使用不同的病毒灭活或去除方法，以确保生物制品在用于治疗或预防疾病时不携带任何潜在的病毒污染风险。层析法、纳米膜过滤法都可作为有效的病毒去除步骤，其中除病毒过滤既不改变物料原有的理化性质，又具有较高LRV值的去除效果，是一种较为理想的病毒污染控制手段。
科百特除病毒过滤膜EPO案例
案例一
- 1.59/L EPO可滤性测试
- 分别使用PTD和PNY预过滤器进行预过滤
- 预过滤后样品单独使用除病毒滤器VF Plus在30psi压力下进行测试
→PDT+VF Plus收率97.7%
→PNY+VF Plus收率99.2%
案例二
- 49/L EPO可滤性测试
- 分别使用PTD和PNY预过滤器进行
- 预过滤预过滤后样品单独使用除病毒滤器VF PLuS在30psi压力下进行测试
→PDT+VF Plus收率97.3%
→PNY+VF Plus收率99.0%
案例三
89/L EPO可滤性测试两组测试:
1.使用PTD预过滤器进行预过滤，预过滤后样品单独使用除病毒滤器VF PlusX，在30psi压力下进行测试
2.使用PNY预过滤器进行预过滤，预过滤后样品单独使用除病毒滤器RCH，在29psi压力下进行测试
→PDT+VF Plus X收率97.9%
→PNY+RC H收率99.8%
针对重组EPO蛋白的除病毒过滤工艺，低浓度低污堵的EPO物料推荐使用VF Plus。对于蛋白浓度较高、高污堵物料，则推荐使用PlusX或者RC H型号除病毒过滤器
过滤过程衰减较少推荐使用PNY尼龙预过滤，衰减较多推荐使用深层模式除病毒预过滤器。需注意，深层预过滤有潜在吸附影响，工艺开发阶段需重点评估产品收率。
病毒安全作为生物制药行业生产过程中的重中之重其去除工艺也需进行综合评估。科百特至今已上市3款PES(聚醚砜)除病毒过滤产品和2款RC(再生纤维素)除病毒过滤产品，并配备除病毒预过滤器，为生物制品病毒安全性保驾护航。
未来，我们也将通过不断升级优化滤膜组件制造工艺，提高产品过滤性能和稳定性，为客户带来更高载量、单位体积过滤成本更低的解决方案。
